毛毕吸虫成虫分离方法的研究初报

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毛毕吸虫成虫分离方法的研究初报  摘 要 目的 为提高毛毕吸虫成虫的收集率。方法 对家鸭行离体或在体肝静脉逆行灌注收集肝内和门静脉内成虫;同时对家鸭灌注降主动脉,以收集肝内、门静脉内和肠系膜静脉的成虫。结果 应用上述方法可收集到大量活的无损伤的成虫。结论 灌注法优于解剖法,且简便、快捷,实用性强。

PRELIMIARY STUDY ON THE METHODS OF SEPARATING

毛毕吸虫成虫分离方法的研究初报

ABSTRACT Aim To improve the collecting rate of the adult worms of ods The adult worms in vena portae and hepaticae interna were collected by the methods of exsomatization and retrograde pouring in vena of livers of adult worms in livers,vena portae and vena mesenterica of ducks were collected by the method of pouring aorta lts A lot of non-traumatic living adult worms and non-traumat could be collected by these collecting rate of the pouring was significantly higher than that of other methords(p<0.05)lusions The method of pouring was more simple,direct,practical and was better than that of dissection.

KEY WORDS Trichobiharzia adult worm pouring collecting method

毛毕属(Trichobilharzia)吸虫为鸟类血吸虫,其尾蚴可侵袭人体引起变态反应性皮炎,该属吸虫宿主较多,家鸭是毛毕属吸虫主要的终宿主之一[1~10]。从家鸭体内分离出成虫,是研究其形态、结构并进行分类的重要基础。作者在淮河水系毛毕属吸虫研究的过程中,对毛毕吸虫成虫的分离方法进行了初步研究,取得了较为满意的结果,现报道如下。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 病鸭 用毛毕属吸虫尾蚴(50条)人工感染的、并在院动物房内饲养30天以上的雏鸭(为当地居民孵化的家鸭);购自当地居民(渔民及农民)于毛毕吸虫流行水域内放养1年以上的阳性家鸭。

1.1.2 药品器材 肝素(Ehter.批号:930407,上海浦江应用生物化学研究所。)乙醚(Diethylether,批号:960423,宜兴市第二化学试剂厂)、注射器、9号注射针头、吊瓶、解剖针、橡皮导管、玻璃导管、手术刀、剪等。

1.2 方法

1.2.1 肝门静脉、肠系膜静脉解剖法 将病鸭(其粪便经毛蚴孵化为阳性的家鸭)固定在解剖台上,用乙醚麻醉后,剖开胸腹部,将肝门静脉和肝静脉结扎,用眼科剪、解剖针和“0”号毛笔剖检肝门静脉和肠系膜静脉分离成虫。即从较细的肠系膜静脉开始,分段以解剖针刺破静脉,并以解剖针从静脉远端驱赶血液(成虫)从刺破处流出,用毛笔轻取流出血液至含有生理盐水的平皿中,用生理盐水反复清洗换水,直至虫体被洗净为止。最后在解剖镜下收集成虫。

1.2.2 在体肝脏灌注法 将病鸭(其粪便经毛蚴孵化为阳性的家鸭)固定在兔解剖台上,在翅根部静脉注射2ml肝素钠(12500U),随即用乙醚麻醉后剖开胸腹部,暴露内脏(操作中应避免划伤心脏和肝脏)。接着在肝静脉出口远端和门静脉起始端各作一切口,分别插入导入管和导出管(上述两管可由普通玻璃吸管替代,其长短、粗细根据鸭子的`大小与静脉的粗细选用)。将含有生理盐水的500ml吊瓶,置于2.5m高处,通过输液皮条与导入管相连,接通生理盐水,生理盐水和成虫一起即可从门静脉导出管口流出(抬高导入端解剖台效果尤佳)。

当流出液中含有较多组织液和血液时,可在量杯中换水沉淀几次,每次5min。若流出液较清晰,立即吸入小培养皿内,在解剖镜下或用肉眼直接分检。

1.2.3 离体肝脏灌注法 将病鸭(其粪便经毛蚴孵化为阳性的家鸭)固定在解剖台上,在翅膀根部注射2ml肝素钠。随即用乙醚麻醉后解剖,暴露内脏。用止血钳或缝合线分别夹(扎)住肝静脉和门静脉起始端,仔细分离肝脏,并移至平皿内。然后将连有生理盐水吊瓶的吸管慢慢插入肝静脉内,接通生理盐水进行灌注,将门静脉流出液倒入300ml量杯内,沉淀,换水2次,缓慢弃去上液,沉淀液倒入小平皿内,在解剖镜下或手持放大镜用肉眼直接分检。