化学合成siRNA阻断小鼠骨髓源性不成熟树突状细胞GAPDH的表达

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全部作者：	蔡端顾晓冬项建斌陈宗佑
第1作者单位：	复旦大学附属华山医院
论文摘要：	目的观察化学合成siRNA在转录后水平即mRNA水平降低小鼠不成熟树突状细胞基因表达的效率，并对其影响因素进行初步探讨。方法体外取小鼠胫骨和股骨的骨髓，分离、培养不成熟树突状细胞，应用化学合成的.不同浓度siRNA在LipofectAMINE 2000转染试剂介导下转染树突状细胞，流式细胞仪检测siRNA的转染效率，RT-PCR检测小鼠不成熟树突状细胞中GAPDH mRNA水平的变化，台盼蓝染色测定各组中培养细胞的存活率。结果脂质体能够将化学合成siRNA转入树突状细胞中，转染终浓度为100～600nmol/L的siRNA能特异有效地阻断GAPDH的表达，而转染终浓度为50～400nmol/L的siRNA有利于细胞存活。结论 siRNA能在不成熟树突状细胞内启动RNA干扰作用，适宜浓度的siRNA能在特异有效地阻断内源性基因表达的同时，最大限度地保持细胞活力。
关键词：	siRNA；树突状细胞；GAPDH；RNA干扰远程下载论文(免费PDF论文全文)
发表日期：	2006年10月17日
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