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RNA干扰对血管内皮生长因子在人宫颈癌细胞系Hela细胞中表达及细

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全部作者：	刘素梅赵淑萍王泽华戴淑真
第1作者单位：	青岛大学医学院附属医院妇产科
论文摘要：	目的探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor， VEGF)的小分子干扰RNA（siRNA）对培养的人宫颈癌Hela细胞增殖的影响，检测VEGF基因及其蛋白表达的情况，了解VEGF基因在宫颈癌发生、发展中的`作用。方法根据siRNA序列设计原则，设计并合成针对VEGF165序列特异性小干扰RNA（siRNA）及阴性对照siRNA，转染人宫颈癌Hela细胞。筛选出最有效的siRNA干扰序列后，用实时荧光定量RT-PCR方法检测转染后Hela细胞中VEGF mRNA的表达，VEGF mRNA的表达以PCR循环数阈值（Ct值）表示，12h开始观察和检测所产生RNA干扰的效果。Western Blot 方法检测VEGF-165蛋白的表达，MTT及细胞计数法检测siRNA转染对培养细胞生长增殖的影响。结果 VEGF siRNA转染Hela细胞后，与对照组相比VEGF mRNA表达水平明显下降，VEGF蛋白表达明显减弱，差异有统计学意义(P<0.05)。实验组Hela细胞生长较对照组明显受到抑制(P<0.05)，从形态学的角度，实验组的细胞明显变小、皱缩、变圆并开始脱落，而无关序列siRNA 及对照则无明显改变（P>0.05），随着时间延长，效果越明显，72 h干扰效率最高。本实验重复性强，同样的实验重复3次结果1致。结论 VEGFsiRNA 可以有效抑制宫颈癌Hela细胞VEGF mRNA及其蛋白的表达水平，抑制细胞生长，表明VEGF基因在宫颈癌的发生、发展中具有重要作用。
关键词：	RNA，小分子干扰；内皮生长因子；荧光定量RT-PCR；基因，抑制，肿瘤；宫颈肿瘤远程下载论文(免费PDF论文全文)
发表日期：	2007年06月13日
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